Forensic Genomics

ForenSeq Imagen Kit

특징

• 하나의 플레이트에서 최대 96개의 라이브러리 동시에 준비
• Unique Dual Index (UDI)를 사용하여 짧은 앰플리콘을 생성함으로써 품질이 저하되고 낮은 양의 샘플에서 DNA 프로파일을 극대화하도록 설계
• PCR inhibitor에 높은 저항성이 있는 버퍼 
• 기존 및 미래의 지역 규제에 기반하여 특정 DNA 특성을 조사하기 위한 두 종류의 프라이머 세트 
     • ​DPME : 피부, 머리카락, 눈 색깔 등 외부에서 볼 수 있는 특성 (external visible characteristics, EVC)을 예측하기 위한 SNP 타켓 증폭
     • DPMF (Geo) : DPME에 있는 EVC 예측 및 생물지리적 조상 (BGA) 마커를 예측하기 위한 SNP 타겟 증폭

eature   Details
  Sample type  Extracted gDNA from a range of common forensic sample types:
  buccal swab lysate, bones, blood, teeth and FTA card 
  Recommended input for gDNA  32 pg–1 ng per sample
  Recommended input for FTA card punch  1.2 mm per sample
  Recommended multiplexing capacity  8–96 libraries per run
  Number of primer mixes  2: DPME and DPMF (Geo)
  Primer mix content  DPME: 22 hair SNPs, 6 eye color SNPs, 36 skin color SNPs 
  and 14 Y-SNPs (total of 55 SNPs)
  DPMF (Geo): 22 hair SNPs, 6 eye color SNPs, 36 skin color SNPs, 
  56 BGA SNPs and 14 Y-SNPs (total of 111 SNPs)
  Short amplicon detection  High concentration of markers <150 bp
  Total library prep time  7 hours and 15 minutes
  Hands-on time  1 hour and 30 minutes
  Total sequencing time  ~18 hours with the Verogen MiSeq FGx Reagent Micro Kit

두 프라이머 세트 모두 머리 색깔 추정을 위한 22개의 SNP, 눈 색깔 추정을 위한 6개의 SNP, 피부색 추정을 36개의 SNP 마커까지 총 41개의 SNP를 포함하며, 일부 SNP는 둘 이상의 표현형에 공통으로 포함되어 있습니다. 두 프라이머 세트 모두 14개의 Y-SNP를 포함하므로 생물학적 성별을 확실하게 추정할 수 있습니다. 또한 생물지리학적 조상 추정을 위한 56개의 SNP가 프라이머 세트 중 하나에 포함되어 있으므로 필요에 따라 선택해서 실험이 가능합니다.

SNP category  Number of markers  Amplicon size range (bp)  Included in DNA primer
     Mix E  Mix F
  Y-SNPs*  14  88-130  Yes  Yes
  Phenotypic SNPs  41  69–227  Yes  Yes
  Hair color  22  92–227  Yes  Yes
  Eye color  6  73–119  Yes  Yes
  Skin color  36  69–213  Yes  Yes
  Biogeographical** ancestry SNPs  56  67–200  No  Yes

* 4 SNPs overlap across eye, skin and hair color phenotypes; 13 SNPs overlap across hair and skin color phenotypes; and 2 SNPs overlap across eye and skin color phenotypes.
** Only available in the EVC+BGA SNP panel (DPMF-Geo).

• 워크플로우

애플리케이션
Forensic DNA Phenotyping (FDP)는 범죄 현장의 DNA 흔적을 통해 외적인 특성을 예측할 수 있습니다. FDP 분석은 표준 DNA 프로파일링이 식원확인 정보를 제공하지 못하는 경우 알려지지 않은 용의자에 대한 정보를 제공하여 경찰수사에 도움이 될 수 있습니다.

소프트웨어 
Verogen ForenSeq Imagen Kit 는 Universal Analysis Software를 사용한 분석에 최적화되어 있습니다. UAS에서 만든 SNP 리포트는 HlrisPlex-S web application에 업로드할 수 있습니다. 복잡한 통계정보를 쉽게 해석할 수 있도록 HlrisPlex-S web application의 보고서는 UAS 데이터 서버의 Imagen-HlrisPlex-S 분석 툴 (I-HAT) 애플리케이션에 의해 해석 될 수 있습니다. I-HAT는매크로는 typed SNP와 관련된 예측 및 확률을 요약하여 사람이 읽을 수 있는 보고서를 생성합니다.