Binding Affinity

결합력 측정

Monolith X

Monolith는 고정화 없이 용액내 분자들의 상호작용을 측정할 수 있습니다.

• 짧은 시간 (~10분)안에 결합력 측정
• Immobilization Free : immobilization 없이 결합력을 측정함으로써 SPR 데이터 검증 
• Intrinsically disordered proteins(IDPs), membrane proteins, large protein complexes, PROTAC, nucleic acids, small molecules or ions를 포함한 다양한 분자들의 결합력 측정  
• 바인딩 파트너의 크기나 질량에 상관없이 측정 가능
• 다양한 버퍼 조건에서 실험 가능 – detergent, DMSO 사용 가능 
• Spectral Shift 기술을 이용해서 결합력을 측정할 때 샘플에 aggregation이 있어도 측정 가능
• Maintenance Free

Monolith 기술 소개

1. Spectral Shift (Monolith X에만 적용) : 분자들간의 상호작용이 일어나면 형광 스펙트럼이 blue shift나 red shift 쪽으로 이동합니다. 이 변화를 650nm와 670nm ratio를 결합 파트너의 농도에 대한 그래프로 플로팅하여 dissociation constant 또는 Kd 값을 계산합니다. 샘플을 섞는 동시에 반응이 일어나므로 짧은 시간안에 측정이 가능하며, MST 기술과 비교했을 때 응집(aggregation)이나 균질화에 영향을 덜 받습니다.

2. MicroScale Themophoresis(MST) : 레이저를 이용해 매우 정교하고 짧은 시간 동안 온도 변화를 일으키면 상호작용이 있는 분자들은 형광 강도의 변화가 일어납니다. 이 변화를 결합 파트너의 농도에 대한 그래프로 플로팅하여 dissociation constant 또는 Kd 값을 계산합니다.